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该研究揭示了lncRNA HOTAIR在后囊混浊（PCO）中的关键作用，发现其通过与m6A甲基转移酶WTAP相互作用，促进METTL3/METTL14复合物的组装，进而增强THBS1表达和上皮-间质转化（EMT）。这一机制为PCO的防治提供了新的分子靶点。
后囊混浊（PCO）是白内障手术后常见并发症，影响患者视力恢复，尤其在儿童中发生率接近100%。目前唯一有效治疗手段为Nd:YAG激光后囊切开，但该方法伴随多种副作用，如晶状体脱位、视网膜脱离等。因此，探索PCO的分子机制，寻找新的干预靶点，具有重要的临床意义。上皮-间质转化（EMT）是PCO形成的重要细胞行为，而N6-甲基腺苷（m6A）RNA修饰作为真核生物中最常见的转录后修饰之一，已被发现与多种疾病相关。但其在PCO中的作用尚未明确。本研究聚焦于长链非编码RNA HOTAIR与m6A修饰在PCO中的作用，发现HOTAIR通过与m6A复合物核心蛋白WTAP结合，促进EMT进程，为PCO的靶向干预提供新思路。
研究首先构建了小鼠白内障手术模型和TGF-β2诱导的人工晶状体上皮细胞（HLE-B3）EMT模型，通过qRT-PCR、Western blot、免疫荧光等方法检测HOTAIR、EMT标志物（E-cadherin、N-cadherin、Vimentin）和m6A修饰水平。结果显示，HOTAIR在术后5天和TGF-β2处理后显著上调，并且主要定位于细胞核中。HOTAIR的表达与EMT标志物变化呈正相关，提示其在EMT过程中发挥调控作用。 在HLE-B3细胞中，通过过表达或敲低HOTAIR，研究人员发现HOTAIR过表达显著增强TGF-β2诱导的细胞增殖、迁移和EMT过程，而HOTAIR敲低则抑制这些效应。RNA免疫共沉淀（RIP）和CatRAPID数据库预测显示，HOTAIR与WTAP直接结合，促进其与METTL3/METTL14复合物的相互作用，进而增强整体m6A甲基化水平。进一步MeRIP-seq和MeRIP-qPCR分析发现，HOTAIR过表达上调多个EMT相关基因（THBS1、FZD5、LZTS1）的m6A修饰，其中THBS1的m6A修饰在多个位点均显著增加，且其mRNA和蛋白表达均被HOTAIR增强。通过构建WTAP过表达和敲低细胞，研究进一步验证HOTAIR对m6A的调控依赖于WTAP，且HOTAIR/WTAP复合物通过促进METTL3/METTL14组装，增强THBS1的表达，进而推动EMT。 此外，研究通过共免疫共沉淀（Co-IP）实验，证实HOTAIR的过表达显著增强WTAP与METTL3和METTL14的结合效率，而HOTAIR敲低则抑制这一过程。MeRIP-qPCR结果进一步表明，WTAP过表达可逆转HOTAIR敲低引起的THBS1 m6A下降，提示HOTAIR/WTAP复合物对THBS1的m6A修饰具有正向调控作用。在动物模型中，免疫荧光染色显示WTAP、METTL3和METTL14主要定位于细胞核，与HOTAIR共定位，支持其在核内调控m6A修饰的假说。 研究还通过表型实验，验证THBS1在HOTAIR/WTAP轴中的关键作用。敲低THBS1可显著逆转HOTAIR过表达诱导的EMT增强、细胞迁移和增殖表型，表明THBS1是该通路的核心效应分子。通过Western blot和Transwell实验，研究发现THBS1的表达水平与EMT标志物变化高度一致，且其m6A修饰受HOTAIR和WTAP双重调控。这些数据共同支持HOTAIR通过促进WTAP与METTL3/METTL14复合物结合，增强THBS1的m6A修饰，从而促进晶状体上皮细胞的EMT，推动PCO形成。
本研究揭示了lncRNA HOTAIR通过与m6A甲基转移酶核心亚基WTAP结合，促进METTL3/METTL14复合物组装，增强THBS1的m6A修饰，从而诱导晶状体上皮细胞的上皮-间质转化（EMT）并推动后囊混浊（PCO）形成。研究结果表明，HOTAIR/WTAP/THBS1信号轴是PCO的重要分子机制，为相关疾病的靶向治疗提供了新的干预策略。
