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本研究利用免疫信息学手段，设计并验证了一种新型多表位疫苗，具有高抗原性、稳定性及表达可行性，为结节性皮肤病疫苗研发提供了新思路。
文献概述
本文《牛结节性皮肤病病毒多表位疫苗候选物的计算设计与重组表达》，发表于《Veterinary World》杂志，回顾并总结了传统疫苗的局限性，并提出了一种新型多表位疫苗候选物。研究整合了四种免疫原性较强的LSDV蛋白的表位，通过生物信息学方法筛选并构建疫苗，同时进行分子对接和动态模拟以验证其稳定性，最后在大肠杆菌中实现重组表达，为疫苗开发提供了实验支持。
背景知识
牛结节性皮肤病（Lumpy Skin Disease, LSD）是一种由结节性皮肤病病毒（LSDV）引发的跨境动物传染病，具有高度传染性，给畜牧业造成重大经济损失。传统减毒活疫苗存在毒力回复、基因重组及免疫原性不足等问题，因此亟需更安全、更精准的疫苗设计。本研究基于P35、A4L、A33R及L1R四种LSDV蛋白，通过表位预测、结构建模、分子对接和表达验证，构建了多表位疫苗候选物。研究还结合了Toll样受体（TLR）的模拟对接，评估疫苗与宿主受体的结合能力。该疫苗在大肠杆菌中成功表达，为后续体内研究及疫苗开发提供了实验基础。
研究方法与实验
研究选取四种免疫原性较强的LSDV蛋白（P35、A4L、A33R、L1R）作为疫苗设计的基础。利用BepiPred、ABCpred、ElliPro等工具预测B细胞表位，并通过NetCTL和NetMHCpan进行T细胞表位预测。筛选后的表位通过EAAAK、AAY、GPGPG和KK等连接子串联，并加入His标签以利于后续检测。通过二级结构与跨膜结构预测，确认疫苗整体结构无误。利用ColabFold和GalaxyRefine进行三级结构建模与优化，结合分子对接和动态模拟评估TLR4结合能力。最后进行密码子优化，并在E. coli BL21中表达疫苗蛋白，通过SDS-PAGE和Western blot验证表达水平。
关键结论与观点
研究意义与展望
该多表位疫苗候选物为结节性皮肤病的预防提供了新的策略，相较于传统减毒疫苗，其安全性更高，且具备更广谱的免疫原性。未来需在动物模型中验证疫苗的免疫原性及保护效力，并优化表达系统以提高产量与稳定性。该研究为跨膜病毒疫苗设计提供了计算与实验结合的参考框架，有助于推动下一代疫苗的发展。
结语
本研究成功构建了一种新型多表位疫苗候选物，具有高度的抗原性和稳定性，并在大肠杆菌中实现了可溶性表达。该疫苗为结节性皮肤病的防控提供了一个安全、高效的替代方案，未来仍需在动物模型中进行免疫原性评估，并优化表达及纯化流程以支持规模化生产。
